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全自動(dòng)五分類血液細(xì)胞分析儀技術(shù)簡(jiǎn)介
全自動(dòng)五分類血液細(xì)胞分析儀技術(shù)簡(jiǎn)介
加入時(shí)間:2012-01-11 09:48:27 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:15567
普朗醫(yī)療器械廠家資訊 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀是醫(yī)院臨床檢驗(yàn)應(yīng)用非常廣泛的儀器之一,是指對(duì)一定體積內(nèi)血細(xì)胞數(shù)量及異質(zhì)性進(jìn)行分析的儀器。20世紀(jì)9o年代以來,隨著電子技術(shù)、流式細(xì)胞技術(shù)、激光技術(shù)、電子計(jì)算機(jī)技術(shù)和新熒光化學(xué)物質(zhì)等各種高新技術(shù)在血液細(xì)胞分析儀中的應(yīng)用,使血液細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理不斷完善、測(cè)量參數(shù)不斷增加、檢測(cè)水平不斷提高.尤其在白細(xì)胞五分類技術(shù)方面,已發(fā)展到利用多項(xiàng)技術(shù)(如射頻、細(xì)胞化學(xué)染色、流式細(xì)胞術(shù)和熒光染色技術(shù)等)聯(lián)合同時(shí)檢測(cè)一個(gè)白細(xì)胞.再用先進(jìn)的計(jì)算機(jī)技術(shù)區(qū)分、辨別經(jīng)上述方法處理后的各自細(xì)胞間的細(xì)胞差別.綜合分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),得出較為準(zhǔn)確的白細(xì)胞分類結(jié)果。為臨床疾病的診斷、治療提供了重要的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。近年來。可以對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行五分類計(jì)數(shù)的全自動(dòng)五分類血液細(xì)胞分析儀已經(jīng)普遍使用。本文就目前血細(xì)胞五分類測(cè)定中常用技術(shù)及其最新應(yīng)用進(jìn)展作一綜述。 1 血細(xì)胞五分類技術(shù)的原理 首先,待測(cè)細(xì)胞經(jīng)處理或染色后被壓人流動(dòng)室,與此同時(shí),不含細(xì)胞的緩沖液在高壓下從鞘液管噴出,鞘液管人口方向與待測(cè)樣品流成一定角度,這樣鞘液就能被包繞著樣品高速流動(dòng),組成一個(gè)圓形的流束,待測(cè)細(xì)胞在包繞下單行排列,依次通過檢測(cè)區(qū)域.在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩個(gè)光源信號(hào)分別反映了細(xì)胞體積的大小和內(nèi)部的信息.經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號(hào),再通過模,數(shù)轉(zhuǎn)換器.將連續(xù)的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的數(shù)字信號(hào),經(jīng)計(jì)算機(jī)處理,可將分析結(jié)果顯示在屏幕上。 為了保證細(xì)胞單個(gè)排列地逐一通過檢測(cè)區(qū)域,鞘流技術(shù)在流式細(xì)胞術(shù)中被廣泛應(yīng)用。根據(jù)層流理論,由于兩種液體的流速和壓力不同。在一定條件下樣品溶液與包裹它的鞘液在流動(dòng)中可以保持相互分離并且同軸。同時(shí)鞘液流可以加速樣品溶液中顆粒的流動(dòng)并迫使他們的流動(dòng)軌跡保持在液流的中軸線上,使細(xì)胞單排列地逐一通過檢測(cè)區(qū)域,這便是所謂的液流聚焦原理 1_2 阻抗法 1.3 激光散射法/多角度偏振光散射技術(shù) 多角度偏振散射技術(shù)用偏振激光束射照單個(gè)排列細(xì)胞,并進(jìn)一步分辨細(xì)胞。該技術(shù)采用了l0度窄角和偏振加消偏振檢測(cè)法,分辨能力有所提高。它首先測(cè)試中性,單核細(xì)胞,用0度~90度的散射數(shù)據(jù),再測(cè)得90度D的衍射差,將嗜酸性和中性細(xì)胞分開.而嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞則按其大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu)不同的復(fù)雜性,所產(chǎn)生的散射光也各異,用可調(diào)較的門限加以區(qū)分。其采用特定程序自動(dòng)儲(chǔ)存分析數(shù)據(jù),并經(jīng)計(jì)算機(jī)軟件處理,在屏幕上顯示6個(gè)散點(diǎn)圖和2個(gè)直方圖。 1.4 各種細(xì)胞化學(xué)特性應(yīng)用技術(shù) 由于嗜酸性(或嗜堿性)粒細(xì)胞均有較強(qiáng)的堿性(或酸性),因此在特殊的溶血?jiǎng)┳饔孟?,?jīng)過特定時(shí)間及溫度的孵育,可使除嗜酸性(嗜堿性)粒細(xì)胞之外的所有細(xì)胞溶解或萎縮.經(jīng)處理之后的細(xì)胞根據(jù)阻抗脈沖計(jì)數(shù)法,可得相應(yīng)嗜酸性(嗜堿性)細(xì)胞有效數(shù)值。 利用五種白細(xì)胞過氧化物酶活性的差異對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行染色,測(cè)定其酶反應(yīng)強(qiáng)度,對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分析。血液中五種白細(xì)胞的過氧化物酶活性排列順序?yàn)椋菏人嵝粤<?xì)胞>中性粒細(xì)胞>單核細(xì)胞。淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞均無過氧化物酶。將待測(cè)血液加入清洗劑和甲醛的等滲液體內(nèi)經(jīng)孵育,再加入過氧化氫和四氯一萘酚,細(xì)胞內(nèi)過氧化酶分解產(chǎn)生氧離子,使四氯一萘酚顯色并沉淀,并定位于酶反應(yīng)部位。根據(jù)酶反應(yīng)強(qiáng)度的不同,利用光電檢測(cè)技術(shù)測(cè)定相應(yīng)吸光度值的方法,用以區(qū)分嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞。 1.5 電導(dǎo),射頻法 1.6 熒光法 |