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國(guó)內(nèi)血細(xì)胞分析儀配套試劑發(fā)展以及前景
國(guó)內(nèi)血細(xì)胞分析儀配套試劑發(fā)展以及前景
加入時(shí)間:2011-12-22 09:00:36 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:5052
傳統(tǒng)血常規(guī)檢查方法是借助于顯微鏡進(jìn)行人工血液紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血涂片染色后顯微鏡進(jìn)行肉眼人工白細(xì)胞分類(lèi),每檢測(cè)一份標(biāo)本至少要20分鐘才能出檢測(cè)報(bào)告,不僅檢測(cè)項(xiàng)目少,且費(fèi)時(shí)費(fèi)力,準(zhǔn)確性、可靠性受到一定影響,難以進(jìn)行質(zhì)量控制。自20世紀(jì)50年代醫(yī)療器械公司研發(fā)并生產(chǎn)的血細(xì)胞分析儀問(wèn)世以來(lái),血細(xì)胞自動(dòng)分析從單一的電阻抗技術(shù)發(fā)展成為多種技術(shù)的融合包括物理學(xué)、化學(xué)、免疫學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)、信息處理技術(shù)、如體積傳導(dǎo)光散射(VCS)、多角度偏振光散射(MAPSS)等,使對(duì)各種血細(xì)胞分析結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠;自動(dòng)化方面,血細(xì)胞自動(dòng)分析已由單一半自動(dòng)不分類(lèi)到的三分群/五分類(lèi)(3/5-part differential)發(fā)展為血細(xì)胞自動(dòng)分析的流水線,即將全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(CBC)、網(wǎng)織紅細(xì)胞(Ret)計(jì)數(shù)、外周血推片和染色等過(guò)程實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化,臨床應(yīng)用方面,血細(xì)胞自動(dòng)分析的檢測(cè)參數(shù)由單一的血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果發(fā)展為可向臨床診斷,鑒別診斷、治療和預(yù)后監(jiān)測(cè)提供數(shù)二十多個(gè)參數(shù)。近年來(lái),我國(guó)在血細(xì)胞自動(dòng)分析領(lǐng)域也取得了十分可喜的成績(jī)。目前,各級(jí)醫(yī)院、鄉(xiāng)鎮(zhèn)、社區(qū)醫(yī)療機(jī)構(gòu)血細(xì)胞分析儀已逐步得到普及,CBC檢測(cè)結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度明顯提高;大中型醫(yī)院檢驗(yàn)科擁有多臺(tái)血細(xì)胞分析儀,有的大型或教學(xué)醫(yī)院還擁有血細(xì)胞自動(dòng)分析的流水線;同時(shí),各級(jí)醫(yī)院已基本建立血細(xì)胞自動(dòng)分析的質(zhì)控程序,大大提高了全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(CBC)的工作效率。 1、血細(xì)胞分析儀的工作原理 1947年,美國(guó)科學(xué)家?guī)鞝柼?/font>(W.H.Coulter)發(fā)明了粒子計(jì)數(shù)技術(shù),它根據(jù)不導(dǎo)電顆粒經(jīng)過(guò)陰陽(yáng)電極間的充滿電解質(zhì)溶液的小孔時(shí),會(huì)產(chǎn)生的瞬間電阻變化,來(lái)感知顆粒的大小和數(shù)量,91212稱為電阻法原理,又稱庫(kù)爾特原理。50年代初應(yīng)用于血細(xì)胞計(jì)數(shù),依據(jù)血細(xì)胞非特異性的性質(zhì),對(duì)電解質(zhì)溶液中懸浮顆粒(血細(xì)胞)在通過(guò)小孔時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行檢測(cè),現(xiàn)市售的血液分析儀基本都采用該原理設(shè)計(jì)。另一種方法是光散射測(cè)量法,同電阻抗法一樣,全血標(biāo)本首先按一定比例稀釋成細(xì)胞懸液,在鞘液的作用下,形成細(xì)胞流,細(xì)胞被排列成單列快速通過(guò)光學(xué)檢測(cè)區(qū),當(dāng)液流中的細(xì)胞與測(cè)定光束相交時(shí),由于血細(xì)胞組成與鞘液不同,引起光散射變化,從不同角度檢測(cè)散射光信號(hào),可以獲得與細(xì)胞體積結(jié)構(gòu)有關(guān)的信息,以此來(lái)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及體積測(cè)定。 血細(xì)胞分析儀在分析計(jì)數(shù)過(guò)程中采用庫(kù)爾特原理,根據(jù)細(xì)胞在測(cè)試過(guò)程中產(chǎn)生的脈沖幅度與儀器設(shè)備的閥值比較而得出。作為全血其細(xì)胞數(shù)量達(dá)10 個(gè)/L之多,直接通過(guò)小孔計(jì)數(shù)難以將每個(gè)細(xì)胞所形成的脈沖信號(hào)區(qū)分開(kāi)來(lái),為此必須對(duì)全血進(jìn)行稀釋,以便于儀器計(jì)數(shù),這就需要儀器使用最基本的試劑——稀釋液,以便對(duì)全血進(jìn)行稀釋。全血中白細(xì)胞數(shù)量約為10個(gè)/L,而紅細(xì)胞計(jì)數(shù)達(dá)10個(gè)/L,前者小于后者1000倍。如采用電阻抗法計(jì)數(shù)時(shí),儀器只能識(shí)別有多少個(gè)顆粒,而無(wú)法識(shí)別哪個(gè)為紅細(xì)胞,哪個(gè)為白細(xì)胞。為了進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類(lèi),儀器設(shè)計(jì)采用另一種試劑——溶血?jiǎng)?,它可以將紅細(xì)胞溶解掉 (溶血作用),再進(jìn)行計(jì)數(shù),就得出全血中白細(xì)胞數(shù)量。每份標(biāo)本測(cè)定完畢之后,都要對(duì)儀器管道、小孔、計(jì)數(shù)池等進(jìn)行清洗,以免相互干擾。所以儀器還要用到起清洗作用的試劑——清洗劑。有些儀器功能較強(qiáng),對(duì)白細(xì)胞還可進(jìn)行五分類(lèi),此時(shí)還用到了鞘液、染色液等試劑。 3、血細(xì)胞分析儀配套試劑的作用 根據(jù)稀釋液在使用過(guò)程中所起的作用,要求其是具有酸堿緩沖作用,適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度和電導(dǎo)率的等滲液。適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度和與血漿相同的滲透壓能在一定時(shí)間內(nèi)完整地保持血細(xì)胞原來(lái)的體積 而合適的電導(dǎo)率能保證獲得與細(xì)胞體積,相應(yīng)的脈沖大小 溶血?jiǎng)﹦t是一類(lèi)強(qiáng)的表面活性劑,它的作用一方面是溶解紅細(xì)胞,進(jìn)行白細(xì)胞分類(lèi)與計(jì)數(shù),另一個(gè)作用是溶解紅細(xì)胞,釋放出血紅蛋白(HGB),形成穩(wěn)定的血紅蛋白衍生物,進(jìn)行血紅蛋白的測(cè)定。不同種類(lèi)的溶血?jiǎng)?duì)白細(xì)胞形狀、大小影響不同,如十六烷基三甲基溴化銨能使白細(xì)胞膜皺縮,胞體縮小,而皂素能使白細(xì)胞體積增大。同一種溶血?jiǎng)舛雀叩筒煌?,?duì)白細(xì)胞體積影響也不同,通常是隨著溶血?jiǎng)舛仍龈?,白?xì)胞體積縮小,測(cè)量時(shí)脈沖也變小。隨著溶血?jiǎng)┑挠昧吭黾踊蛉苎獣r(shí)間的延長(zhǎng),白細(xì)胞破裂,皺縮在細(xì)胞核周?chē)陌麧{顆粒及胞膜脫落,而僅剩細(xì)胞核。清洗劑則主要是清洗管道,避免標(biāo)本之間污染。
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