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    目前，全自動血液細(xì)胞分析儀已經(jīng)成為各個(gè)醫(yī)院做血液檢查的最為常用的醫(yī)療器械，下面，普朗小編來為大家詳細(xì)介紹一下全自動五分類血液細(xì)胞分析儀的工作方法和原理。

                                                                         

    五分類血液分析儀和三分類全自動血液細(xì)胞分析儀相比，由于增加了對嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞的常規(guī)檢測，更能滿足臨床需要，因此將逐漸進(jìn)入各級醫(yī)院檢驗(yàn)科 為能選擇一臺適合自己醫(yī)院的五分類血液分析儀，現(xiàn)對五分類血液分析儀的白細(xì)胞分類原理和代表型號做簡要分析。

    1 電阻抗、高頻電導(dǎo)及激光散射聯(lián)合檢測法即VCS技術(shù)
    V：代表體積容量(volume)也就是庫爾特首創(chuàng)發(fā)明的電阻抗原理．把電阻法微孔技術(shù)應(yīng)用于計(jì)數(shù)血細(xì)胞和測定其體積的大小。C：代表傳導(dǎo)性即電導(dǎo)(conductivity)．指一束電磁波或稱射頻．穿透細(xì)胞的傳導(dǎo)性，它取決于細(xì)胞的大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu)；經(jīng)校正后的傳導(dǎo)性叫opacity即“不透明性”．這時(shí)不再反映細(xì)胞大?。欠从臣?xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)．像核的大小，核漿比例和密度等。S：代表散射(scatter)．指在不同角度測得的散射光強(qiáng)度。由于各類細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)不同和顆粒大小不同而對光的散射各異，進(jìn)而區(qū)分各類細(xì)胞。庫爾特公司設(shè)計(jì)在單一通道上同時(shí)用這三種方法對同一白細(xì)胞進(jìn)行測量，避免了有些血液分析儀要設(shè)計(jì)好幾個(gè)通道或加染色試劑的麻煩。儀器具體的運(yùn)作是：根據(jù)流體力學(xué)的原理，應(yīng)用鞘流技術(shù)使溶血后剩余的白細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞單個(gè)通過檢測器，接受VCS三種技術(shù)的同時(shí)檢測，完成白細(xì)胞分類過程。VCS技術(shù)在Coulter公司的STKS型、MAXM 型以及Gen．s型五分類血液分析儀上均已成功的應(yīng)用。而且MAXM 型和Gen．s型可計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞，Gel1．S型可選配自動制血片機(jī)。以上幾種型號還可直接計(jì)數(shù)CD 和CD。淋巴細(xì)胞，并算出其比率。

    2 光散射和細(xì)胞化學(xué)染色聯(lián)合檢測法 
    即利用激光散射和過氧化物酶染色技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分類。利用光散射的原理計(jì)數(shù)血細(xì)胞，因細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)不同，在不同角度上散射光有差別，有助于對白細(xì)胞的區(qū)分。白細(xì)胞化學(xué)染色即是在稀釋液中加入過氧化酶(MPO)的底物及現(xiàn)色劑，根據(jù)白細(xì)胞對MP0的反應(yīng)分類。中性細(xì)胞MP0 為強(qiáng)陽性，嗜酸性細(xì)胞陽性更強(qiáng)，單核細(xì)胞為弱陽性，淋巴細(xì)胞性，嗜堿性細(xì)胞亦為陰性，故綜合光散射和細(xì)胞化學(xué)染色的特點(diǎn)，在電腦顯示屏上可得到類似流式細(xì)胞儀的二維或三維圖像一一不同顏色的散點(diǎn)圖．并可打出分類結(jié)果。由于嗜堿性細(xì)胞不含此酶，不能被檢測．因此一些儀器專門設(shè)置了嗜堿性細(xì)胞檢測系統(tǒng)。它的測量通道采用時(shí)間差的方法，與RBC／PLT的測量系統(tǒng)共用一個(gè)通道。在激光技術(shù)中目前有半導(dǎo)體激光和氣體激光。半導(dǎo)體激光功率弱，但作為細(xì)胞分類自己足夠；氣體激光功率強(qiáng) 二者比較半導(dǎo)體激光具有壽命長(7～1O年)體積小，啟動快．耗電小，對穩(wěn)壓要求低，更為’經(jīng)濟(jì)適用等特點(diǎn)。

    3 電阻抗和射頻電導(dǎo)聯(lián)合檢測法 
    這種方法是分別采用四個(gè)檢測系統(tǒng)來檢測不同類型的細(xì)胞① 淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞檢測系統(tǒng)：在細(xì)胞懸浮淮中加入溶血劑使紅細(xì)胞溶解，而使白細(xì)胞保持完整，細(xì)胞漿及核形態(tài)近似于生理狀態(tài)，當(dāng)這些細(xì)胞通過檢測系統(tǒng)時(shí)，對白細(xì)胞進(jìn)行電阻抗法(測量細(xì)胞體積)和射頻電導(dǎo)法(檢測細(xì)胞核和顆粒密度)的聯(lián)合檢測，結(jié)果將細(xì)胞分成淋巴細(xì)胞、單核細(xì)和中性粒細(xì)胞三個(gè)群體。② 嗜酸性細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞兩種檢測系統(tǒng)：在細(xì)胞懸浮液中加入特殊的溶血劑，除嗜酸性細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞外，其他細(xì)胞均被溶解或萎縮。再對保持完整的嗜酸性細(xì)胞或嗜堿性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。③幼稚細(xì)胞檢測系統(tǒng)：在細(xì)胞懸浮液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，結(jié)合在幼稚細(xì)胞的氨基酸比成熟細(xì)胞多。且對溶血劑有抵抗作用，當(dāng)加入溶血劑時(shí)．成熟細(xì)胞被溶解，只保留著可能存在的幼稚細(xì)胞用來計(jì)數(shù)。

    4 多角度激光偏振光散射檢測法 
    采用這種技術(shù)的儀器使用鞘流液將標(biāo)本血稀釋，稀釋后白細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài)，只有嗜堿性細(xì)胞由于其吸濕的特性而使細(xì)胞結(jié)構(gòu)有輕微改變。紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白在高滲透壓的作用下。從細(xì)胞中分離出來。而鞘流的水分則進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)．使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)仍然完整，它與鞘流的折光系數(shù)相同，不影響白細(xì)胞的檢測。儀器同時(shí)從四個(gè)角度來檢測通過激光束的細(xì)胞所產(chǎn)生的散射光，因?yàn)榧?xì)胞大小、折射指數(shù)、核形、核漿比率以及顆粒性質(zhì)等，均可影響在不同角度測得的散射光量。前角散射光用來測定細(xì)胞的體積，狹角散射光用來測定細(xì)胞結(jié)構(gòu)。垂直散射光對細(xì)胞內(nèi)部顆粒及細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行測量。消偏振光散射將嗜酸性細(xì)胞從中性粒細(xì)胞和其它細(xì)胞中分離出來。所有原始數(shù)據(jù)，借助先進(jìn)的電腦軟件處理，在屏幕上顯示6個(gè)散點(diǎn)圖和2個(gè)直方圖。