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如何選擇酶標(biāo)儀的測定波長
如何選擇酶標(biāo)儀的測定波長
加入時間：2014-03-27 11:17:49 當(dāng)前新聞點擊率：11238
酶標(biāo)儀的標(biāo)準(zhǔn)配置包括405nm,450nm,490nm及630nm四塊濾光片，具有紫外功能的酶標(biāo)儀還配備有340nm。
目前用于酶聯(lián)免疫吸附測定,最常使用的標(biāo)記用酶是辣根過氧化物酶(HRP)，對應(yīng)的底物通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)。底物在過氧化氫溶液的存在下，經(jīng)辣根過氧化物酶作用，分別氧化為2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和聯(lián)苯醌。
鄰苯二胺(OPD)的氧化產(chǎn)物DAB, 在pH值為5．0左右時，在450nm波長處有最大吸收，此時可用450nm的濾光片測定吸光值。當(dāng)加入強(qiáng)酸作為終止試劑終止反應(yīng)時，pH值降到接近0，此時最大吸收波長移至492 nm，此時可用492nm的濾光片測定吸光值。
四甲基聯(lián)苯胺(TMB)的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌，一般在波長為450nm處有最大消光系數(shù)。使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min，便于檢測。
 （普朗醫(yī)療品牌產(chǎn)品——酶標(biāo)分析儀9606）
因此，450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定最常用的。有的酶標(biāo)儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。
除了這兩個基本濾光片外，考慮到雙波長比色的需要，還應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片，雙波長比色主要用于消除非特異干擾的影響。
如果一般醫(yī)院或是醫(yī)療器械單位實驗室需要用酶標(biāo)儀作微量生化測定，就需要擴(kuò)展紫外檢測功能，此時需要一個340 nm波長濾光片。
總之，以上介紹的是常用的幾個波長的濾光片，用戶還可以根據(jù)自己的需求選擇其他波長的濾光片。一般各種酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的部件，可以同時安裝6～8片濾光片，可以滿足用戶的不同需求。 上一篇:
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