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自50年代初庫爾特先生發(fā)明了粒子計數(shù)技術(shù)之后便誕生了第一臺血細(xì)胞分析儀并應(yīng)用于臨床以來,血細(xì)胞分析儀的發(fā)展已有50年的歷史.血細(xì)胞分析儀實質(zhì)上是指對一定體積內(nèi)血細(xì)胞數(shù)量及異質(zhì)性進(jìn)行分析的儀器.最初的血細(xì)胞計數(shù)儀(Cell Counter)僅能計數(shù)紅細(xì)胞(RED)和白細(xì)胞(WBC),后來又有了血紅蛋白(HBG),血小板(PLT),紅細(xì)胞壓積(HCT),平均紅細(xì)胞體積(MCV)等幾個參數(shù).而發(fā)展成為血細(xì)胞分析儀(Hematology Analyzer)后,又增加了許多分析和計算參數(shù),如紅細(xì)胞體積分布寬度(RDW),平均血小板體積(MPV),血小板體積分布寬度(PDW),血小板壓積(PCT),大血小板比率,白細(xì)胞三分群,白細(xì)胞五分類,血紅蛋白濃度分布寬度,異常淋巴細(xì)胞提示,幼稚細(xì)胞提示等各種參數(shù)和功能也不斷地添加到一些品牌的儀器上.同時也為以醫(yī)療器械公司帶來機遇與挑戰(zhàn)

        電阻檢測法的基本原理是:在待測液體中置一微孔,在微孔的兩端各加一定電壓的電極,當(dāng)液體中的顆粒巾進(jìn)經(jīng)過微孔時,電極間的電阻就會產(chǎn)生訓(xùn)瞬間的變化,以因而產(chǎn)生電脈沖,對這種電脈沖進(jìn)行計數(shù)就可得到顆粒的數(shù)量,脈沖幅度的大小表示顆粒的體積的大小,經(jīng)過對各種細(xì)胞所產(chǎn)生脈沖的大小的電子的選者擇,可以區(qū)分出不同種類的細(xì)胞;在液體中加上一定的負(fù)壓就能使經(jīng)過微孔的液體流動.

        隨著電子技術(shù),流式細(xì)胞技術(shù),激光技術(shù),電子計算機技術(shù)和新熒光化學(xué)物質(zhì)等多種高科技技術(shù)在臨床檢驗工作的應(yīng)用,使血細(xì)胞分析儀在自動化程度,先進(jìn)功能和完美設(shè)計方面提高到了一個嶄新的階段,血細(xì)胞分析儀已經(jīng)不僅僅局限在進(jìn)行常規(guī)的血細(xì)胞分析,還增加了許多擴展功能,例如將網(wǎng)織紅細(xì)胞(RET)的計數(shù)和分析功能加入其中,一些儀器還另外增加了幼稚細(xì)胞分析和有核紅細(xì)胞分析功能,甚至對血液細(xì)胞中某些寄生蟲進(jìn)行提示,更有一些儀器把流式細(xì)胞分析儀的某些功能和并到血細(xì)胞分析儀上,在進(jìn)行常規(guī)血細(xì)胞分析時可得到某些淋巴細(xì)胞亞群的分析結(jié)果.

        在常規(guī)血細(xì)胞計數(shù)儀上,紅細(xì)胞(RBC),血小板(PLT)共用一個測量通道,血紅蛋白含量(HGB)的測定在任何類型,檔次的儀器中其測試原理都是相同的.白細(xì)胞的計數(shù)和分類有其專用的通道,現(xiàn)我們就對分析儀上各測試項目所使用的技術(shù)方法和原理作些簡要介紹.

一、血紅蛋白含量測定

        血紅蛋白含量的測定是在被稀釋的血液中加入溶血劑后,使紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白,后者與溶血劑結(jié)合形成血紅蛋白衍生物,進(jìn)入血紅蛋白測試系統(tǒng),在特定波長(一般在530-550nm)下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成比例,儀器便可顯示Hb濃度.不同系列的血液分析儀配套溶血劑配方不同,形成的血紅蛋白衍生物也不同,但大多數(shù)的最大吸收光譜接近540nm.近年來許多高檔的分析儀上采用了激光散射法進(jìn)行單個血紅細(xì)胞血紅蛋白的分析,以盡量減少高WBC,乳糜血,高膽紅素等對HBG比色的影響.

二、血紅細(xì)胞及血小板的檢測

        血紅細(xì)胞的檢測是血液分析儀的重要組成部分,紅細(xì)胞的檢測以往主要還是使用阻抗法對紅細(xì)胞的數(shù)目和體積計數(shù),以此分選出不同大小的信號并打印出紅細(xì)胞體積分布直方圖.但現(xiàn)在也采用光學(xué)和電阻抗法結(jié)合的處理方法對紅細(xì)胞體積進(jìn)行三維空間分析(3D)以期得到更正確的結(jié)果.如拜爾的ADVIA 120以光散射法檢測紅細(xì)胞,以低角度前向光散射和高角度散射兩個測量系統(tǒng)同時測量1個紅細(xì)胞,根據(jù)低角度光轉(zhuǎn)換能量的大小測量單個紅細(xì)胞體積與總數(shù);根據(jù)高角度的光散射得出單個血紅蛋白濃度,可準(zhǔn)確得出MCV(平均紅細(xì)胞體積),MCH(平均血紅蛋白含量),MCHC(平均血紅蛋白濃度)測定值,并繪出紅細(xì)胞散射圖,單個紅細(xì)胞體積及紅細(xì)胞內(nèi)Hb含量的直方圖及求出RWD(紅細(xì)胞體積分布寬度),HDW(紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度)等參數(shù).

        由于血小板和紅細(xì)胞體積的明顯差異,很容易用一個限定閾值將兩者同時測得的光電信號區(qū)分.因此,迄今為止全血分析中血小板,紅細(xì)胞檢查均采用一個共用的分析系統(tǒng).但由于血小板和紅細(xì)胞測量信號常有交叉,如大血小板的脈沖信號可能被誤認(rèn)為紅細(xì)胞而計數(shù),小紅細(xì)胞的脈沖信號可能進(jìn)入血小板通道,造成實驗誤差.各血細(xì)胞分析儀生產(chǎn)廠家采用多種先進(jìn)技術(shù)以減少血小板計數(shù)的干擾,以下我們就分別給予介紹:

        掃流技術(shù)(sweep flow):由于血小板和紅細(xì)胞在同一個計數(shù)池中計數(shù),紅細(xì)胞體積較大,在通過正中計數(shù)感應(yīng)區(qū)時會形成一個大脈沖,若有回流會同時又產(chǎn)生一個因渦流再度進(jìn)入感應(yīng)區(qū)邊緣而形成的小脈沖使電極可能感應(yīng)到相當(dāng)于血小板大小的小脈沖,使血小板計數(shù)假性增多.掃流技術(shù)是在進(jìn)行紅細(xì)胞和血小板計數(shù)的同時,在紅細(xì)胞計數(shù)小孔的后面有一個穩(wěn)定的液流通過,這樣可以使后的紅細(xì)胞被立即沖走,以防止回到感應(yīng)區(qū)被計數(shù)為血小板.